Ang bacterial endotoxin test (BET) ay ginagawa sa karamihan ng mga modernong laboratoryo sa ilalim ng mga kontroladong kondisyon bilang mahalagang salik upang maiwasan ang pagkagambala.
Angkopaseptikong pamamaraanay mahalaga kapag naghahanda at nagpapalabnaw ng mga pamantayan at humahawak ng mga sample.Naka-gowningmagsanay sa labas ng normal na laboratoryo personal protective equipment (PPE) ang mga kinakailangan ay hindi isang alalahanin maliban kung ang produkto sa ilalim ng pagsubok ay humihingi ng mga partikular na pagsasaalang-alang sa kaligtasan ng analyst dahil sa toxicity o pagkahawa.Mga guwantesay dapat na walang TALC, dahil ang TALC ay maaaring maglaman ng makabuluhang antas ng mga endotoxin.Mga plate reader, paliguan ng tubig, at tuyong mga bloke ng initna ginagamit para sa sample incubation ay dapat nasa laboratory bench na malayo sa heating, ventilation, at air conditioning (HVAC) ducts, makabuluhang vibration, at trapiko sa laboratoryo na maaaring makaapekto sa mga resulta ng pagsubok.Mga halimbawang oras at kundisyon ng holddapat matukoy at pagkatapos ay idokumento, kung kinakailangan, upang matiyak na ang mga tumpak na resulta ng pagsubok ay maaaring mabuo sa kwalipikadong oras.
Halimbawa, kung ang laboratoryo ay nakatanggap ng Water for Injection (WFI) o in-process na sample, dapat ba itong palamigin o maaari itong manatili sa temperatura ng kuwarto, at hanggang kailan?Bago ang pagsubok, inirerekomenda na ang (mga) pangunahing sample na lalagyan ay sapat na paghaluin bago alisin ang (mga) pagsubok na aliquot para sa alinman sa direktang pagsubok o kasunod na pagbabanto.
Bioendo Bacterial Endotoxin Test, kasama ang mga eksperimentopamamaraan ng gel clotendotoxin test assay atquantitative endotoxin test assay, gel namuong paraan endotoxin test assay ay husay endotoxin detection, ang mga eksperimentong ito ay nangangailangan ng consumables ay depyrogenation processing, tulad ng endotoxin libreng reaksyon tubes, pagbabanto tubes at pyrogen libreng tip;quantitative endotoxin detection ay may kinetic chromogenic endotoxin test, kinetic turbidimetric endotoxin test, ang mga eksperimentong ito ay nangangailangan ng mga consumable na kailangang matugunan ang pinakamataas na antas ng endotoxin na mas mababa sa0.005EU/ml( 0.001EU/ml ), tulad ng mga endotoxin free tubes, pyrogen free tip, at pyrogen free microplate, kahit na pyrogen free resevoir.Sa pamamagitan ng paraan, kung ang mga sample ng paggamot, ang lalagyan ay dapat na ang endotoxin libreng sample na bote.
Sa pagsusuri sa endotoxin, maaaring magmula ang interference mula sa iba't ibang pinagmumulan, tulad ng mga sample na bahagi ng matrix, test reagents, o kagamitan.
Upang maiwasan ang panghihimasok sa eksperimento, maaaring gawin ang mga sumusunod na hakbang:
1. Paghahanda ng Sample: Ang wastong paghahanda ng sample ay mahalaga para sa tumpak na pagsusuri sa endotoxin.
Ang sample matrix ay dapat na lubusang masuri at ma-optimize upang matiyak ang pagiging tugma sa endotoxin assay.
Sa partikular, ang mga nakakasagabal na substance gaya ng mga lipid at protina ay dapat na alisin o i-minimize gamit ang mga naaangkop na pamamaraan tulad ng pagsasala o centrifugation.
2. Positibo at Negatibong Mga Kontrol: Mahalagang isama ang mga positibo at negatibong kontrol sa pagsusuri upang masubaybayan ang interference.
Kinukumpirma ng mga positibong kontrol ang functionality ng pagsubok, habang ang mga negatibong kontrol ay nakakakita ng anumang kontaminasyon o interference mula sa mga bahagi ng assay.
3. Quality Control: Ang kontrol sa kalidad ay dapat gawin sa lahat ng reagents, kagamitan, at tubig na ginamit sa assay.
Tinitiyak nito na ang mga reagents ay libre mula sa kontaminasyon ng endotoxin at gumagana nang tama.
4. Standardisasyon: Ang assay ay dapat na istandardize upang matiyak na ang lahat ng mga resulta ay maihahambing at maaaring kopyahin.
Kabilang dito ang paggamit ng isang karaniwang curve upang i-calibrate ang assay at ang paggamit ng mga standardized na pamamaraan para sa paghahanda ng sample, incubation, at detection.
5. Pagpapatunay: Ang assay ay dapat na mapatunayan upang matiyak na ito ay tiyak, sensitibo, at maaasahan.
Kabilang dito ang pagsubok sa isang hanay ng mga sample, kabilang ang mga kilala na naglalaman ng endotoxin, upang matukoy ang katumpakan at katumpakan ng assay.
Sa pamamagitan ng pagsunod sa mga hakbang na ito, maaaring mabawasan ang interference, at makakamit ang tumpak na pagsusuri sa endotoxin.
Oras ng post: Dis-01-2022
